1 试验原理
参考《GB/T 27825-2011 化学品皮肤吸收体内试验方法》和文献资料对重组胶原蛋白复配产品进行破损皮肤的透皮试验。采用活体动物破损皮肤涂抹携带荧光标记的重组胶原蛋白产品，收集不同透皮时间点的皮肤样本制作冷冻切片，利用标记物的荧光特性，通过荧光显微镜分析受试物在皮肤中的荧光信号，同时采集动物血液分析受试物是否进入血液，评价受试物透皮吸收情况。
2 试验目的
采用在体方法，模拟临床使用条件对重组胶原蛋白复配产品进行透皮试验。分析重组胶原蛋白在皮肤和血液中的吸收情况。
3 试验动物
选用健康、皮肤无损伤的成年雄性豚鼠。
4 实验仪器设备
...
5 试验过程
将豚鼠麻醉后，剃毛，用合适的手术器械模拟人体表皮擦伤制备皮肤模型。
模拟人体表皮使用方法，在豚鼠造模区域的两侧涂抹FITC荧光标记样品，空白对照组涂抹相同体积的溶媒。待溶液被完全吸收后将豚鼠放回饲养笼，避光，正常饮食饲养，每个组做XX个重复。
涂抹样品后分别在XXh、XXh和Xh时间点，将豚鼠麻醉作以下处理：
取血样；取完整皮肤，用OTC包埋。采用高效液相色谱分析法对采集的血浆和血清样本进行FITC标记胶原蛋白含量检测。
重组胶原蛋白：是生物高分子，通过合成生物学理念和技术获得的新型医用材料，与人体胶原蛋白特定功能区的氨基酸序列排列和结构一致，能够精准重现胶原蛋白本身的功能。一般是白色、透明的粉状物。
异硫氰酸荧光素（FITC）：黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水。 FITC有异构体Ⅰ和异构体Ⅱ,其最大吸收波长495nm，最大发射波长为525nm。异构体Ⅰ常用于蛋白标记，能与各种蛋白结合，结合后的蛋白不丧失其特异性，并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光，加酸后析出沉淀，荧光消失。
FITC标记反应：将重组胶原蛋白纯品配制成XXg/L的溶液，加入相应比例的FITC，溶解后在XX℃下避光搅拌反应XXh，所得产物即为FITC标记物粗品。
6 结果与分析
血液分析结果；皮肤切片观察结果
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