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原2022年8月12日-线上研讨会- 《医疗器械无菌检验》客户问题总结答疑
时间:2022-08-18   浏览:596次

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1、疑似长菌的培养基转入新鲜培养基的操作环境是哪个房间?
答:由于疑似长菌是不确定供试品里真正有微生物存在,所以疑似长菌的培养基转入新鲜培养基操作环境,仍然要求在百级条件下进行操作,以防环境不符合要求带来污染,导致试验结果不准确,以免造成误判、错判。
 
2、供试品无菌检查时做阳性对照试验,阳性对照应在无菌室还是阳性对照室操作?
答:供试品无菌检查时要求做阳性对照试验,阳性对照管是分别需要两个环境间才能完成。在无菌室是接种规定量供试品;在阳性室则是接种不大于100cfu对照菌悬液。
 
3、培养基已经有质量报告,培养基还需要做无菌性和灵敏度检查吗?
答:培养基即使有质量报告,新购买培养基的无菌性和灵敏度检查需要再验收。因为培养基是微生物试验的基础,若培养基的无菌性或灵敏度不符合规定,则检验结果应无效。《中国药典》2020版培养基质量管理要求应建立接收标准并进行符合性验收,包括品名、批号、数量、生产单位、外观性状、处方和使用说明,有效期、贮藏条件、生产商提供的质量报告等。
 
4、生孢用FTM计数培养18小时了,现在还未长,33摄氏度培养,是什么原因呢?
答:注:由于学员所提问的题目描述不够完整,无法完成答题。那么,那就科普一下有关生孢梭菌生物学特性和培养注意事项吧:生孢梭菌是革兰氏染色阳性菌,以周身鞭毛运动,为一群严格厌氧芽孢梭菌,电镜下细胞大小(0.3~0.4)μm×(1.4~6.6)μm。呈梭状芽孢杆菌,两端钝圆,单个或短链存在。在FTM固体培养基上菌落直径2~6mm,中部突起,白色至淡黄色,边缘假根状,半透明,表面无光泽。
 
生化试验:能分解蛋白质和糖类。发酵葡萄糖和麦芽糖,产丁酸和少量乙酸等。存在于土壤、伤口和肠道内。属于亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌,过氧化氢酶阴性。
 
培养注意事项:在FTM固体培养基上操作时,因氧气会对厌氧菌产生毒害作用,因此整个操作过程应在专门的无氧设备中进行。如在正常空气中操作,从厌氧菌暴露在空气中开始到放入厌氧环境中培养结束,整个过程应尽可能快速操作,一般不超过15分钟,暴露时间越长,厌氧菌越容易死亡,不容易成功。需在厌氧条件下接种,培养温度为30~35度,可采用厌氧罐、厌氧培养箱、厌氧产气包等方式提供厌氧环境,除了确保气体环境无氧之外,有些厌氧菌通常还需要5%-10%的二氧化碳、氢气等气体促进生长并提高厌氧菌对氧气的耐受性,更容易培养成功。在装量为50mlFTM流体培养基试管中(无需厌氧环境培养),生长的微生物分散成小米状,注意菌数点计选择在30~50之间,否则菌数太多无法计数。
 
5、阳性间传递窗对室外是正压吗?
答:是的。
 
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